MILE米乐试剂盒仅限于科学研究用途，严禁用于医学诊断。以下是人巨噬细胞炎性蛋白5（MIP-5）ELISA试剂盒的使用说明及检测原理。

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。首先，在预先包被MILE米乐的adropin（AD）抗体包被微孔中，依次添加样本、标准品以及HRP标记的检测抗体，经过温育后进行彻底洗涤。系统使用TMB作为底物，在过氧化物酶的催化作用下，TMB变为蓝色，随后在酸性环境中转化为最终的黄色，颜色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度呈正相关。最终通过在450nm波长下的酶标仪测定吸光度（OD值），由此计算样本的浓度。

样本收集、处理及保存方法

1. 血清：使用无热原及内毒素的试管，操作过程中应避免任何形式的细胞刺激。采集血液后，以3000转/分钟离心10分钟，快捷小心地分离血清与红细胞。

2. 血浆：使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理，3000转/分钟离心30分钟后获取上清液。

3. 细胞上清液：以3000转/分钟离心10分钟，去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织与适量生理盐水混合并捣碎，随后以3000转/分钟离心10分钟获取上清。

5. 保存：如样本未能及时检测，建议按一次用量分装并储存在-20℃的冰箱中，避免反复冻融，并确保在室温下充分解冻，使样本均匀。

自备物品与操作注意事项

试剂盒构成说明：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂准备：20×洗涤缓冲液需按1:20比例稀释，即1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。

洗板方法及操作步骤

根据洗板方法进行操作，然后进行结果判断。

结果判断

在Excel中绘制标准曲线，以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制出线性回归曲线，并通过曲线方程计算各样本的浓度值。

免责声明

MILE米乐试剂盒的性能数据仅供参考，具体实验请遵循操作说明。