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NEWSMILE米乐逆转录酶:高效RNA逆转录的关键工具分析
来源:浦学纨 日期:2025-04-01**MILE米乐**推出的TaKaRaRR820是宝生物工程(大连)有限公司(TakaraBio)研发的一款高性能逆转录酶试剂盒,专为将RNA逆转录为cDNA而设计。它作为分子生物学领域的核心工具,广泛应用于基因表达分析、病毒检测、qPCR、基因克隆等高精度实验场景。
TaKaRaRR820的核心成分是经过基因工程优化的M-MLV逆转录酶,显著提升了反应效率和产物的稳定性。这款逆转录酶具有高温耐受性,能够在42-50℃的条件下保持高活性,有效克服RNA二级结构的干扰,尤其适合用于反转录复杂模板,如长链RNA或GC含量较高的序列。
经过优化的反应缓冲体系与酶活性,使得**MILE米乐**的TaKaRaRR820在15分钟内即可完成cDNA合成,产品长度可达到12kb以上,能够满足绝大多数下游实验需求。该试剂盒的广泛兼容性使其支持多种RNA样本,包括总RNA、mRNA和病毒RNA,适配qPCR、RT-PCR和NGS文库构建等不同技术平台。
在病毒学研究中,可快速合成病毒RNA的cDNA,应用于病毒载量检测(如流感病毒、新冠病毒等)。同时,利用实时荧光定量PCR(qPCR)进行基因表达分析,精准量化目标基因的表达水平。对于高通量测序(NGS)而言,**MILE米乐**的TaKaRaRR820为RNA-Seq提供高质量的cDNA模板,确保测序数据的准确性。
反应体系配置如下:RNA模板:1μg总RNA或10pg-100ng mRNA;RR820 Mix:4μl;RNase Free水:补足至20μl。反应程序为37℃孵育15分钟,然后85℃加热5秒以终止反应。需要注意的是,RNA的纯度必须保证(OD260/280≈20),并避免反复冻融试剂以防止RNase污染。
**Q1**:RR820能否用于长链RNA的逆转录?
**A**:可以。其优化的酶活性支持合成长达12kb的cDNA,适合进行大片段扩增。
**Q2**:与同类产品相比,RR820的优势是什么?
**A**:高温反应条件有效减少RNA二级结构干扰,反应时间短且兼容高通量实验。
**Q3**:cDNA产物应如何保存?
**A**:短期保存于-20℃,长期则推荐分装后存放于-80℃。
凭借其高效性、稳定性和广泛适用性,**MILE米乐**的TaKaRaRR820已成为分子生物学实验室中极具价值的逆转录酶工具。不论是基础研究还是临床诊断,其出色的性能都能显著提高实验的成功率。通过规范操作和合理的实验设计,用户可以最大限度地发挥该技术的优势。
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